Cette chambre rend hommage aux deux filles et aux trois belles-filles de Catherine de Médicis : la reine Margot, Élisabeth de France, Marie Stuart, Élisabeth d'Autriche, et Louise de Lorraine. Le plafond à caissons du xvie siècle arbore en effet les armoiries des cinq reines.

Sur les murs on peut voir une suite de tapisseries des Flandres du xvie siècle représentant le Siège de Troie et l'Enlèvement d'Hélène, les Jeux du cirque dans le Colisée, et le Couronnement du roi David. Une autre évoque un épisode de la vie de Samson. Le mobilier se compose d'un lit à baldaquin, de deux crédences gothiques surmontées de deux têtes de femmes en bois polychrome et d'un coffre de voyage recouvert de cuir clouté.

Aux murs sont exposés L'Adoration des Mages, étude pour le tableau de Rubens (musée du Prado), un portrait de la duchesse d'Olonne de Mignard, ainsi qu’Apollon chez Admète l'argonaute, dû à l'école italienne du xviie siècle.